पतली परत क्रोमैटोग्राफी एक स्थिर चरण के रूप में 0.1-0.5 मिमी की मोटाई के साथ एक सॉर्बेंट परत के उपयोग के आधार पर एक रासायनिक विश्लेषण विधि है। टीएलसी विधि का उपयोग विभिन्न क्षेत्रों में किया जा सकता है और विभिन्न प्रकार के रासायनिक यौगिकों के निर्धारण की अनुमति देता है।
विधि सिद्धांत
पतली परत क्रोमैटोग्राफी की विधि का जन्म पेपर क्रोमैटोग्राफी से हुआ था और पहला प्रयोग 19 वीं शताब्दी के 80 के दशक में किया गया था। इस विश्लेषण का सक्रिय उपयोग 1938 के बाद ही शुरू हुआ।
टीएलसी तकनीक में एक मोबाइल चरण (एलुएंट), एक स्थिर चरण (शर्बत), और एक विश्लेषण शामिल है। स्थिर चरण को एक विशेष प्लेट पर लगाया और तय किया जाता है। प्लेट कांच, एल्यूमीनियम या प्लास्टिक से बनी हो सकती है - ये पुन: प्रयोज्य सब्सट्रेट हैं जिन्हें प्रत्येक उपयोग के बाद सॉर्बेंट के आवेदन के लिए अच्छी तरह से धोया, सुखाया और तैयार किया जाना चाहिए। कागज की प्लेटों का उपयोग करना भी संभव है जिन्हें उपयोग के बाद निपटाया जाता है।
सिलिका जेल का उपयोग अक्सर स्थिर चरण के रूप में किया जाता है, लेकिन अन्य शर्बत का उपयोग करना संभव है, उदाहरण के लिए, एल्यूमीनियम ऑक्साइड। इस या उस शर्बत का उपयोग करते समय, परिणाम सटीक होने के लिए प्रौद्योगिकी का कड़ाई से पालन किया जाना चाहिए, उदाहरण के लिए, क्योंकि सिलिका जेल गलत परिणाम दे सकता है यदि प्रयोगशाला में हवा बहुत अधिक नम है।
सॉल्वैंट्स का उपयोग मोबाइल चरण के रूप में किया जाता है, उदाहरण के लिए, पानी, एसिटिक एसिड, इथेनॉल, एसीटोन, बेंजीन। विलायक का चुनाव जिम्मेदारी से किया जाना चाहिए, क्योंकि क्रोमैटोग्राफी का परिणाम सीधे उसके गुणों (चिपचिपापन, घनत्व, शुद्धता) पर निर्भर करता है। प्रत्येक विश्लेषण किए गए नमूने के लिए एक व्यक्तिगत विलायक का चयन किया जाता है।
विश्लेषण
नमूना एक विलायक में पतला होना चाहिए। यदि पूर्ण विघटन नहीं होता है और बहुत अधिक अशुद्धियाँ रहती हैं, तो नमूने को निष्कर्षण द्वारा साफ किया जा सकता है।
प्लेट में नमूने का आवेदन स्वचालित रूप से या मैन्युअल रूप से किया जा सकता है। स्वचालित अनुप्रयोग एक माइक्रोस्प्रे विधि का उपयोग करता है जहां प्रत्येक नमूने को सब्सट्रेट के उपयुक्त क्षेत्र पर छिड़का जाता है। मैनुअल एप्लिकेशन के लिए, एक माइक्रोपिपेट का उपयोग किया जाता है। प्रत्येक नमूने के लिए प्लेट पर पेंसिल के निशान रखे गए हैं। प्रत्येक नमूने को एक केशिका के साथ प्लेट में एक पंक्ति में निशान से पर्याप्त दूरी पर लगाया जाता है ताकि सीसे से कार्बन के साथ प्रतिक्रिया न हो।
प्लेट को एक बर्तन में रखा जाता है, जिसके नीचे एलुएंट डाला जाता है। समर्थन को एक किनारे से पोत में चिह्नित रेखा तक रखा जाता है। मोबाइल चरण के वाष्पीकरण से बचने के लिए पोत को कसकर बंद कर दिया गया है। केशिका बलों की कार्रवाई के तहत, एलुएंट सॉर्बेंट परत को ऊपर उठाना शुरू कर देता है। जब एलुएंट एक निश्चित स्तर तक पहुंच जाता है, तो प्लेट को बर्तन से हटा दिया जाता है और सूख जाता है।
यदि वांछित पदार्थ का कोई रंग नहीं है, तो यह सब्सट्रेट पर दिखाई नहीं देगा। इसलिए, विज़ुअलाइज़ेशन किया जाता है - आयोडीन वाष्प या अन्य रंगों के साथ प्लेट का प्रसंस्करण।
इस तरह के प्रसंस्करण के बाद, परिणाम का मूल्यांकन किया जाता है। शर्बत पर अलग-अलग तीव्रता के रंगीन क्षेत्र दिखाई देते हैं। किसी पदार्थ (या पदार्थों के समूह) को निर्धारित करने के लिए, रंगीन क्षेत्रों, उनके आकार, तीव्रता और गतिशीलता की तुलना संदर्भ नमूने से की जाती है।
टीएलसी पद्धति का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है क्योंकि यह तेज, सस्ता, सटीक, सहज ज्ञान युक्त है, जटिल उपकरणों की आवश्यकता नहीं है, और व्याख्या करना आसान है।
